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  • Agilent1100液相基本操作步驟

    發布于 2011/03/07閱讀(2935)標簽 Agilent11

    摘要

    Agilent1100液相基本操作步驟 ,操作規程,維修

    內容

    一)、開機:
        1、打開計算機,進入Windows NT (或Windows 2000)畫面,并運行Bootp Server程序。
         2、打開 1100 LC 各模塊電源。
         3、待各模塊自檢完成后,雙擊Instrument 1 Online圖標,化學工作站自動與1100LC
             通訊,進入的工作站畫面如下所示。
       4、從“View”菜單中選擇“Method and Run control”畫面, 單擊”View”菜單中的“Show Top Toolbar”,“Show status toolbar”,“System diagram”,”Sampling diagram”,使其命令前有“√”標志,來調用所需的界面。
       5、把流動相放入溶劑瓶中。
       6、打開Purge閥。
       7、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Setup pump選項,進入編輯畫面。
       8 、設Flow:5ml/min,單擊OK。
       9、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Pump control選項,選中On,單擊OK,則系統開始Purge,直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續Purge,直到所有要用通道無氣泡為止。
       10、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Pump Control選項,選中Off,單擊Ok關泵, 關閉
    Purge  valve
       11、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Setup pump選項,進入Pump編輯畫面,設Flow:1.0ml/min。
       12、單擊泵下面的瓶圖標,如圖所示(以二元泵為例),輸入溶劑的實際體積和瓶體積。也可輸入停泵的體積。單擊O(二)數據采集方法編輯:
    1、開始編輯完整方法:
         ●   從“Method”菜單中選擇“Edit entire method” 項,如上圖所示選中除“Data    analysis ”外的三項,單擊Ok,進入下一畫面。
    2、方法信息:
    ●    在“Method Comments”中加入方法的信息(如:方法的用途等)。
    ●   單擊Ok 進入下一畫面。
    3、泵參數設定:(以二元泵為例)
    ●  在“Flow”處輸入流量,如1ml/min,在“Solvent B”處輸入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,編輯梯度。在“Pressure Limits Max”處輸入柱子的最大耐高壓,以保護柱子。
         ●  單擊Ok進入下一畫面。
    4、自動進樣器參數設定:
    ●  選擇合適的進樣方式, 如圖所示,進樣體積 1.0ul ,洗瓶位置為6號?!癝tandard Injection”----只能輸入進樣體積,此方式無洗針功能?!癐njection with Needle Wash”----可以輸入進樣體積和洗瓶位置,此方式針從樣品瓶抽完樣品后,會在洗瓶中洗針?!癠se injector program”---可以點擊Edit 鍵進行進樣程序編輯。
    ●  點擊Ok進入下一畫面。
    5、柱溫箱參數設定:
          ●  在”Temperature”下面的方框內輸入所需溫度,并選中它,點擊”more>>” 鍵,如圖所示,選中”Same as left”---使柱溫箱的溫度左右一致。
           ●  點擊ok進入下一畫面。
    6、VWD檢測器參數設定:
          ●  在”Wavelength”下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm,  在”Peak width (Response time)”下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應時間, 如>0.1min  (2s)。
           ●  在Timetable 中可以“Insert”一行,輸入隨時間切換的波長,如1min  ,波長=300nm。點擊ok進入下一畫面。
    7、DAD檢測器參數設定:
    ●     檢測波長: 254nm,BW=30nm,     參比波長=350nm,BW=100nm; 
    ●     檢測波長:一般選擇最大吸收處的波長。樣品帶寬BW: 一般選擇最大吸收值一半處的整個寬度。參比波長:一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區域。參比帶寬BW:至少要與樣品信號的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。Peak width(Response time):其值盡可能接近要測的窄峰峰寬。Slit—狹縫窄,光譜分辨率高;寬時,噪音低。同時可以輸入采集光譜方式,步長,范圍,閾值。選中所用的燈。
    ●    點擊Ok進入下一畫面。
    8、                RID檢測器參數設定:
    ●    色譜條件:  
    進樣體積: 20ul 。      光學單元溫度:  Off 。
    極性: 正 。           峰寬(響應時間) :  4s  。
    ●  如圖所示: “Optical Unit Temperature”---若環境溫度控制在±2℃,設定為Off,  若環境溫度不穩定,則設定光學單元溫度為高于環境溫度5度,以防樣品在池中沉淀。“Peak width”---大多數分析設為4S,只有在高速分析下設為更短?!癆utomatic recycling after analysis”---在不進行分析時可以讓流動相循環,節省流動相,檢測器連續運行,可隨時投入使用。
     ●   ***** 點擊RID圖標,選擇RID  Control :Heater 設為On,若要循環流動相,必須將“Recycling Valve”設為ON。手動purge 參比池,將其設為On,并輸入Purge 時間。 
    9、                FLD檢測器參數設定:
     色譜條件: 
     ●   樣品:P/N 01018-68704  用甲醇稀釋為1:10。
     ●    進樣體積:5ul。
     ●    柱溫箱:  30℃ 。   EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。
     ●    響應時間=4s.     停止時間: 出峰完畢。
     ●    Excitation A: 激發波長:200-700nm,步長為1nm,或Zero Order。
     ●    Emission:     發射波長: 280-900nm, 步長為1nm,或Zero Order。
     ●    PMT:          大多數應用適當的設定值為10,若高濃度樣品峰被切平頭,則減少 PMT 值。
     ●  “Peak width”:大多數應用設為4s,只有快速分析采用小的設定值。
     ●    Multi Ex 多波長及光譜(激發)。
     ●    Multi Em多波長及光譜(發射)。
     ●    同時可以輸入范圍Range、步長step、采集光譜。
    10、        在“ Run time checklist ”中選中“Data acquisition”,單擊Ok。
    11、        單擊“Method”菜單,選中“Save method as”,輸入一方法名,如“test”,單擊Ok。
    12、        從菜單 “View”中選中”Online signal” ,選中Windows 1,然后單擊Change 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊Ok.(如同時檢測二個信號,則重復12,選中
    Windows 2)。
    13、        從“Run  control ”菜單中選擇“Sample info”選項,如上圖所示,輸入操作者名稱,在“Data file ”中選擇“Manual”或“Prefix”。
    區別:    Manual--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數據覆蓋掉。   Prefix—在Prefix 框中輸入前綴,在Counter 框中輸入計數器的起始位,儀器會自動命名,如vwd0001,vwd0002……。
    14、        從Instrument 菜單選擇System on。
    15、        等儀器Ready,基線平穩,從Method菜單中選擇“Run method”,進樣。
    (DAD, VWD色譜圖如下所示:)
    (三)、數據分析方法編輯:
    1、  從“View”菜單中,單擊“Data analysis”進入數據分析畫面。
    2、  從“File”菜單選擇“Load signal”,選中您的數據文件名,如下圖所示。單擊Ok。
    3、  做譜圖優化,從“Graphics”菜單中選擇“Signal options”選項,。從Ranges中選擇Auto scale及合適的顯示時間,單擊ok,或選擇”Use Ranges” 調整。反復進行,直到圖的比例合適為止。
    4、積分:
     (1)、從“Integration”中選擇 “Auto integrate”,如積分結果不理想,再從菜單中選擇“Integration  Events”選項,選擇合適的Slope sensitivity,Peak width,Area reject,Height reject。
     (2)、從“Integration”菜單中選擇“Integrate”選項, 則數據被積分。
     (3)、如積分結果不理想,則修改相應的積分參數,直到滿意為止。
     (4)、單擊左邊“√”圖標,將積分參數存入方法。
    5、打印報告:
    (1)、從“Report”菜單中選擇“Specify report”選項,進入如上畫面。
    (2)、單擊“Quantitative  Results”框中Calculate右側的黑三角,選中Percent(面積百分比),其它選項不變。
    (3)、單擊Ok.
    (4)、從“Report”菜單中選擇“Print report”,則報告結果將打印到屏幕上,如想輸出到打印機上,則單擊Report 底部的“Print”鈕。
    (四)、關機:
     
    ●  關機前,用 100%的水沖洗系統20分鐘,然后用有機溶劑沖洗系統10分鐘(如ACN),然后關泵,(適于反相色譜柱)。[正相色譜柱用適當的溶劑沖洗]
    ●  退出化學工作站,及其它窗口,關閉計算機(用shut down關)。
    ●  關掉Agilent 1100電源開關。

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